培養基制備的注意事項

　　培養基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養物質和環境條件。培養基的質量直接關系到檢驗結果的準確性和可靠性，因此對于微生物檢驗而言，培養基的質量控制尤為重要。那么你知道培養基制備的注意事項有什么嗎？讓我們一起來看看吧！

　　一、配置要求

　　正確地制備培養基是進行微生物檢驗的基礎。當實驗人員使用商業化脫水合成培養基來配制培養基時，應嚴格按照產品說明進行配制，并做好配制記錄。在配制過程中，實驗人員需要遵守相關操作標準，戴上口罩以防吸入含有有毒物質的培養基粉末。在稱量和溶解培養基時應使用專門的角匙，避免使用金屬制品以防止金屬離子污染培養基，從而影響微生物的生長。在準確稱量后，應首先加入適量的水進行充分溶解，然后再加入所需量的水進行加熱。在加熱過程中，應不斷攪拌以防止培養基在容器底部積聚。調節培養基的pH值后，將其分裝到比培養基體積大20%的容器中，并按照說明進行滅菌處理。對于粉末狀態的培養基，在開封后應妥善保存在陰涼干燥處，并及時使用，以免受潮、結塊或污染等情況發生。二、配制用水

　　水是制備培養基不可缺一部分，通常使用純化水。此外，還應定期檢查用于配制培養基的水的微生物污染情況，以確保其符合純化水的要求。

　　三、滅菌

　　滅菌能夠確保培養基的質量符合標準。在實驗室中，常采用濕熱滅菌法對培養基進行滅菌處理。培養基的滅菌應按照產品使用說明的要求進行操作，并在每次滅菌時放置壓力蒸汽滅菌化學指示卡以驗證滅菌效果。有些培養基可以通過煮沸的方式進行滅菌，例如結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養基和亞硫酸鉍瓊脂培養基。實驗人員應及時將培養基從滅菌鍋中取出，并盡快冷卻至所需溫度，以防止加熱過度對實驗數據產生影響。在使用培養基前，還需檢查其pH值、色澤和均勻度等指標，以確保符合要求后貼上標簽，并標明名稱、日期、有效期等基本信息。

　　四、制備

　　在制備平板培養基時，應將經滅菌處理的培養基傾注于經滅菌處理的干燥平皿中，使其形成至少3mm的厚度。一般來說，直徑為90mm的平皿通常需要加入18～20mL的瓊脂培養基，而需要保存或培養超過48小時的培養基則需要傾注更多的培養基。制備好的培養基應立即使用或儲存，儲存時應標記培養基的名稱和制備日期，并將其密封后放置在2～8℃的冰箱中。而在制備斜面培養基時，應先將培養基分裝到試管中，通常每管加入10mL的培養基，然后進行高壓滅菌。在培養基冷卻凝固前，將試管傾斜一定角度放置，待其冷卻凝固后方可使用和儲存。至于液體培養基，則根據使用要求直接分裝至三角瓶或試管中，進行滅菌處理后冷卻至室溫，即可直接使用或儲存。

　　五、儲存

　　驗收入庫的培養基應嚴格按照生產廠家標明的儲存條件、保存期限、使用方法保存和使用。開封后的商品化脫水合成培養基要放置在密閉容器中保存，在瓶身注明s次開封日期。實驗室自制培養基應避光、干燥保存，需冷藏的培養基可放置在2～8℃冰箱中保存，平板保存時間通常為2～4周，瓶裝及試管裝培養基保存時間一般為3～6個月，具體效期應進行驗證。每次使用培養基前，要觀察顏色變化、流動性、均勻性、是否結塊和是否污染等情況。如果發現培養基出現受潮、結塊、其他性狀明顯改變的情況，應停止使用。

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