Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒的原理與注意事項有什么？

Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒是用于體外定量檢測血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中FA/VB9濃度的，那么你知道Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒的原理與注意事項有什么嗎？讓我們一起來看看吧！

一、檢測原理

Elabscience葉酸/維生素B9(FA/VB9)ELISA試劑盒采用競爭ELISA法。用 FA/VB9 抗原包被于酶標(biāo)板上，實驗時樣品（或標(biāo)準(zhǔn)品）中的 FA/VB9與包被的FA/VB9 競爭生物素標(biāo)記的抗 FA/VB9 單抗上的結(jié)合位點，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB 在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450 nm波長處測OD值，F(xiàn)A/VB9 濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中 FA/VB9 的濃度。

二、注意事項

1) 收集血液的試管應(yīng)為一次性無內(nèi)毒素試管。避免使用溶血，高血脂樣品。

2) 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測可保存于2-8℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測)，或-80℃(3個月內(nèi)檢測)，避免反復(fù)凍融。在檢測前，冷凍過的樣本應(yīng)緩慢地融化并離心除去凍融過程產(chǎn)生的沉淀物。室溫混勻后使用。

3) 試劑盒檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍。如果樣品中待測物濃度過高或過低，請對樣本做適當(dāng)?shù)南♂尰驖饪s。

4) 若所檢樣本不在說明書所列樣本之中，建議做預(yù)實驗驗證其檢測有效性。

5) 若使用化學(xué)裂解液制備組織勻漿或細(xì)胞提取液，由于引入某些化學(xué)物質(zhì)會導(dǎo)致ELISA測值出現(xiàn)偏差。

6) 某些重組蛋白可能與試劑盒中捕獲或檢測抗體不匹配而出現(xiàn)不能檢測的情況。

7) 試驗中請穿著實驗服并戴乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時，請按國家生物試驗室安全防護(hù)條例執(zhí)行。

8) 請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液。未用完的濃縮生物素化抗體(100×)、濃縮HRP酶結(jié)合物(100×)、酶標(biāo)板及其他原液按照上述表格中保存條件存放。

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